普通生物显微镜的放大倍数可达几百倍。一般真菌和酵母菌等微生物个体较大，用低倍物镜和高倍物镜即可得到良好的效果。但要看到经染色的细菌的形态和真核生物细胞的形态构造，最好使用油镜头。

油镜比干燥系高倍物镜的工作距离短得多，最短的只有0.1mm，且调焦程序又不同于干燥系物镜，操作时须特别细心，防止油镜压碎标本或损坏油镜。

先在干燥系高倍物镜下找准被检物，并置于视野中央，然后升高镜筒约1.5cm，再把油镜头旋转至对准正下方。在玻片标本的镜检部位滴一滴浸液（镜头油），将头偏于一侧观察，下降镜筒，到物镜的前透镜与浸液接触时停止。继而从目镜里细心观察视野，旋转粗准焦螺旋，使镜筒缓慢地上升，刚出现不太清晰的物像时就 换用细准焦螺旋，至物像清晰后进行观察。

初次使用油镜，也可按照干燥系物镜的调焦程序调节焦距。即先下降镜筒至物镜最接近盖玻片，但绝不能压在标本上，再上升物镜调焦。但此法有将浸液挤出去和造成空泡的缺点。若上调粗准焦螺旋时，镜筒已升到油浸镜头离开油滴，仍不能发现被检目的物，须重新调节。

油镜使用的镜头油为香柏油或石蜡油。因香柏油黏稠度较高，使用之后擦拭较麻烦，因而许多人采用石蜡油代替使用。滴浸液时，要尽量避免气泡的形成，如果形成了气泡，可用解剖针尖将气泡排在一边，以免影响观察。

油镜使用完毕，提升镜筒约2cm，把油镜转离光轴，先用擦镜纸擦去镜头上的大部分油，再用蘸少量二甲苯的擦镜纸擦去镜头上的残余油迹，最后用干擦镜纸擦去镜头上的二甲苯。擦拭时要顺镜头的直径方向，不要沿镜头的圆周方向擦。玻片标本上的油也要进行清洁，即把一小张擦镜纸盖在载玻片油滴上，在纸上滴一些二甲苯，趁湿把纸往外拉，这样连续作三四次即可干净（如果是使用石蜡油，清洁时只用擦镜纸不必滴二甲苯）。

油镜的使用原理：

油镜的透镜很小，光线通过玻片与油镜头之间的空气时，因介质密度不同，发生折射或全反射，使射入透镜的光线减少，物像显现不清。若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515），则使进入透镜的光线增多，视野亮度增强，使物像明亮清晰。

由于细菌体积微小，故在细菌的形态学研究中，经常需要借助显微镜油镜，才能比较清楚地进行观察。因此，必须熟练地掌握油镜的使用及保护法。

（一）油镜头的识别：

各接物镜的放大率可由其外形辨认，镜头长度越大，镜片直径越小，放大倍数大；反之，放大倍数小。油镜头长度大于低、高倍镜，镜头下缘一般刻有一圈黑线或白线，并刻有100X、1.25或oil等字样。

（二）油镜的使用法：

1、准备：

使用显微镜油镜时，必须将显微镜端正直立桌上，不得将镜臂弯曲，使载物台倾斜，以免香柏油流溢，影响观察，污染台面。

2、对光：

采用天然光为光源时，宜用平面反光镜；若用人工灯光时，则用凹面镜。

首先打开光圈，转动反光镜，使光线集中于集光器。可根据需要，上下移动集光器和缩放光圈，以获得最佳光度。

一般用低倍镜或高倍镜观察物像或用油镜检查不染色标本时，需下降集光器并适当地缩小光圈，使光度减弱；若用油镜检查染色标本时，光度宜强。应将显微镜亮度开关调至最亮，光圈完全打开，集光器上升至与载物台相平。

3、调焦距：

A、将标本片放载物台上，用标本推进器固定，将欲检部分移至接物镜下。先用低倍镜找出标本的位置，然后提高镜筒，在标本的待检部位滴镜油一滴，再换油镜观察。

B、转动粗调节器使载物台徐徐上升（或使镜筒渐渐下降），直至油镜头浸没至油中。此时眼睛应从侧面观察，以免压碎标本片和损坏镜头。

C、然后双眼移至接目镜，一面从接目镜观察，一面反方向缓慢地转动粗调节器（下降载物台，或上升镜筒），当出现模糊物像时，换用细调节器，转动至物像清晰为止。

D、观察完毕，应先提高镜筒，并将油镜头扭向一侧，再取下标本片。油镜头使用后，应立即用擦镜纸擦净镜头上的油。若镜油粘稠干结于镜头上，可用擦镜纸蘸 少许二甲苯擦拭镜头，并随即用干的镜纸

擦去残存的二甲苯，以免二甲苯渗入，溶解用以粘固透镜的胶质物，造成镜片移位或脱落。